前言
白血病(leukemia)是造血組織的惡性增殖性疾病，其特點(diǎn)是骨髓及其他造血組織中大量無核細(xì)胞無限制增生，進(jìn)入外周血液，臨床表現(xiàn)以骨髓、脾、肝等造血器官中的白血病細(xì)胞惡性增生與腫大，并浸潤到全身各組織臟器中，伴有不同程度的貧血、出血、感染發(fā)熱以及骨骼疼痛。白血病的發(fā)病率和死亡率逐年增加，居35歲以下青少年惡性腫瘤的首位。因此，制備相應(yīng)的動(dòng)物模型對其研究具有重要的意義。絕大多數(shù)人類白血病可以用化學(xué)（如燒化劑）、物理（如電離輻射）、生物（如反轉(zhuǎn)錄病毒）以及轉(zhuǎn)基因方法，在不同動(dòng)物（小鼠、豚鼠、大鼠、貓、牛、長臂猿等）中誘發(fā)白血病，建立動(dòng)物模型。
部分造模方法
使用動(dòng)物：小鼠
【造模機(jī)制】：
bcr/abl轉(zhuǎn)基因小鼠模型：通過克隆分析小鼠Tec基因的啟動(dòng)子序列和功能，發(fā)現(xiàn)由Tec啟動(dòng)子調(diào)控的基因僅特異性地表達(dá)在造血干細(xì) 胞的細(xì)胞質(zhì)中。采用小鼠的Tec基因的啟動(dòng)子序列，制備轉(zhuǎn)基因載體，攜帶白血病相關(guān)基因bcr/abl，制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。轉(zhuǎn)基因小鼠首先出現(xiàn)粒細(xì)胞異常增生、高血小板血癥，經(jīng)一定時(shí)間后發(fā)生骨髓增殖綜合征，和人CML極為相似。其中有轉(zhuǎn)基因鼠在出生后即表現(xiàn)為急性白血病，但它們的子代經(jīng)過一段潛伏期后表現(xiàn)骨髓增生綜合征。另外一種轉(zhuǎn)基因小鼠是高表達(dá)持續(xù)活化的突變Stat5，此突變的stat5攜帶2個(gè)突變位點(diǎn)，可以和內(nèi)源性stat5結(jié)合，形成二聚體，持續(xù)活化。這種小鼠生長發(fā)育過程中發(fā)生白血病。還有突變基因敲入(knock-in)模型。如，SHP-2D61G、SHP-2E76K基因敲入小鼠，均發(fā)生白血病。
【模型特點(diǎn)】：
利用不同的啟動(dòng)子已建立起幾個(gè)能模擬人CML的轉(zhuǎn)基因小鼠品系。與反轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染并移植法建立的CML模型相比，轉(zhuǎn)基因小鼠模型有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：①bcr/abl基因作為轉(zhuǎn)基因小鼠的一部分在體內(nèi)表達(dá)，更能精確地模擬人CML；而反轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染并移植法建立的CML模型在細(xì)胞培養(yǎng)、移植過程受許多細(xì)胞因子的影響，這些細(xì)胞因子和處理受體鼠的其他因素都對疾病的表型有較大的影響。②bcr/abl轉(zhuǎn)基因鼠可以傳代，而反轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染并移植法建立的CML模型須重新建立。③轉(zhuǎn)基因CML模型有一定的潛伏期，這與人的CML極為相似；而反轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染并移植法建立的CML模型潛伏期短，不利于人CML發(fā)病前機(jī)制的研究。④轉(zhuǎn)基因鼠的CML有類似于人CML的單克隆性，而反轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染并移植鼠的CML是多克隆的。轉(zhuǎn)基因CML也存在一些缺點(diǎn)：①轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的每一個(gè)細(xì)胞都有bcr/abl基因的表達(dá)，而人的CML只在造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞中表達(dá)，這或許會(huì)影響CML的病理特性和治療情況；②SHP-2061G小鼠正常生長發(fā)育過程中僅發(fā)生髓系增殖病，但輻照后發(fā)生白血病及其他腫瘤；③SHP-2E76K是條件性敲入小鼠，胚胎小鼠如果血液系統(tǒng)表達(dá)SHP-2E76K突變會(huì)導(dǎo)致小鼠胚胎致死，所以僅在小鼠出生后，用Poly I:C誘導(dǎo)血液系統(tǒng)Cre表達(dá)，導(dǎo)致小鼠造血干細(xì)胞或者祖細(xì)胞表達(dá)SHP-2E76K突變蛋白，小鼠發(fā)生白血病。
【模型的評估和應(yīng)用】：
由于bcr/abl轉(zhuǎn)基因小鼠模型存在遺傳還不夠穩(wěn)定、模仿CML還不夠精確等缺點(diǎn)，因此還需要尋找更合適的啟動(dòng)子，探索更便利的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方法，嘗試更近似的動(dòng)物品種。目前主要用于以下3方面的研究：證實(shí)CML是否造血干細(xì)胞源性，研究bcr/abl基因與其他相關(guān)基因?qū)Π籽」餐绊懀委熕幬锏暮Y選。SHP-2061G及SHP-2E76K敲入小鼠是很好的白血病動(dòng)物模型，但需要商品化。
參考文獻(xiàn)：
1.鄧揚(yáng)嘉，徐詣芝，婁世鋒．急性髓性白血病SCID小鼠模型的建立及鑒定．現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008,8(1): 53-55
2.朱玉峰，王元占，孟凡義．BCR/ABL轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型研究進(jìn)展及應(yīng)用．中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2011,19 (6):1532-1535
3.劉偉，季明春，李厚達(dá). 人慢性粒細(xì)胞白血病動(dòng)物模型研究進(jìn)展．中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2005,15 (1):55-58
4.李麗霞，湯永民，顧偉忠，等．急性B淋巴細(xì)胞白血病動(dòng)物模型的建立. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2008,37(5): 511-514
5.楊曉鯤. 鄭峻松，張新，等．GITR抗體對L615白血病抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006,28 (18):1837-1841
6.周曉燕，鄒琳．白血病小鼠模型的建立與應(yīng)用現(xiàn)狀．分子診斷與治療雜志，2011,3 (3):212-216
7.Ohsugi T, Yamaguchi K, Kumasaka T, et a]_ Rapid tumor death model for evalualion of new therapeutic agents for adult T-cell leukemia. Lab Invest,2004, 84 (2): 263-266
8.Ramshaw HS, Bardy PG, Lee MA, el al. Chronic myelomoaocylic leukemia requires granulocyte macrophage colony-stimulating factor for growth in vitro and in vivo. Exp Hematol,2002,30(10):1124-1131
9.Wang S, Yu WM, Zhang W, et al. Noonan syndrome/ leukemia-associated gain-of-function mutations in SHP-2 phosphatase (PTPN 11) enhance cell migration and angiogenesis. J Biol Chem, 2009, 284 (2):913-920
10.Xu D,Wang S,Yu WM,et al. A germline gain-offunction mutation in Ptpn 11 (Shp-2) phosphatase induces myeloproliferative disease by aberrant activation of hemalopoielic stem cells. Blood, 2010, 116(18):3611-3621
號二維碼.jpg)
