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急性腎盂腎炎動(dòng)物模型
當(dāng)前位置:首頁(yè) > 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型目錄 > 泌尿系統(tǒng)模型 > 急性腎盂腎炎動(dòng)物模型

前言

腎盂腎炎(pyelonephritis)又稱(chēng)上尿路感染,是病原微生物侵入腎盂、腎間質(zhì)和腎實(shí)質(zhì)所引起的炎癥性病變,好發(fā)于女性,男:女為1 : 10。根據(jù)臨床病程及癥狀,腎盂腎炎可分為急性及慢性?xún)善凇<毙阅I盂腎炎若治療不當(dāng)??蓮?fù)發(fā)或轉(zhuǎn)為慢性,最終進(jìn)入慢性腎功能不全階段。雖然隨著疾病譜的變化,以腎盂腎炎為基礎(chǔ)病變導(dǎo)致慢性腎功能不全的比例逐漸下降,但腎盂腎炎的發(fā)病率、復(fù)發(fā)率以及急性腎盂腎炎的轉(zhuǎn)慢率并未見(jiàn)降低。因此,制作與人類(lèi)腎盂腎炎相似的動(dòng)物模型,從發(fā)病機(jī)制上認(rèn)識(shí)腎盂腎炎,研究行之有效的治療方案是一項(xiàng)很有意義的工作。

部分造模方法

使用動(dòng)物:大鼠

【造模機(jī)制】:

暫時(shí)性結(jié)扎一側(cè)輸尿管,向膀胱內(nèi)注入大腸埃希菌,造成急性尿路感染,可形成急性、逆行性腎盂腎炎。

【造模方法】:

1.動(dòng)物 雄性Sprague Dawley大鼠,體重(200±20)g。

2.模型制備 選用大腸埃希菌O111B4標(biāo)準(zhǔn)菌株,37℃培養(yǎng)箱中肉湯過(guò)夜培養(yǎng)24小時(shí),使其濃度達(dá)0.5麥?zhǔn)蠁挝?,再用加樣器稀釋菌懸液,使最終濃度達(dá)105/ml。大鼠禁水18小時(shí)后,2%戊巴比妥鈉40mg/kg,腹腔注射麻醉。動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上,腹部皮膚去毛后消毒,下腹正中切口約2cm, 逐層切開(kāi)腹壁進(jìn)入腹腔,在左側(cè)后腹壁辨識(shí)左側(cè)輸尿管后,在中段兩側(cè)分別向后腹壁外側(cè)穿線(xiàn),暴露膀胱,用動(dòng)脈夾夾閉陰莖,用TB針向膀胱內(nèi)緩慢注射0.5ml菌液,然后拉緊腹壁外側(cè)的縫合線(xiàn)兩端,以適當(dāng)?shù)乃删o度“結(jié)扎”輸尿管,清理腹腔,逐層縫合腹壁,恢復(fù)供水和飲食。術(shù)后24小時(shí)拆去腹壁外面的輸尿管結(jié)扎線(xiàn),使輸尿管重新開(kāi)放。

3.樣本收集和指標(biāo)測(cè)定 術(shù)后第7天用小夾子夾住尿道外口,防止尿液流出,處死動(dòng)物,取出左右腎臟。肉眼觀(guān)察雙腎大小及表面并稱(chēng)重,縱行切開(kāi)腎觀(guān)察縱切面,無(wú)菌操作抽取膀胱尿液,接種于平板培養(yǎng)基上,取1/2左腎制成勻漿做培養(yǎng),將縱切的另1/2左腎做病理組織切片,染色光鏡檢查。

【模型特點(diǎn)】:

1.結(jié)扎側(cè)腎臟表面可見(jiàn)數(shù)量不等的微小膿腫,個(gè)別腎臟可見(jiàn)較大膿腫突出腎臟表面,病變較重模型組動(dòng)物左腎明顯大于右腎,縱切面可見(jiàn)大小不等的膿腫,腎盂擴(kuò)張,有少量膿性分泌物。

2.動(dòng)物左腎組織出現(xiàn)明顯病理學(xué)改變,腎盂黏膜充血水腫,黏膜下大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),腎內(nèi)可見(jiàn)大小不等的膿腫,少數(shù)腎小管內(nèi)可見(jiàn)膿細(xì)胞和管型。

3.動(dòng)物尿路感染嚴(yán)重,尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率高達(dá)80%,左腎組織勻漿細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率也高達(dá)80。

【模型評(píng)估和應(yīng)用】:

人類(lèi)腎盂腎炎的致病菌以大腸埃希菌最多,逆行性感染是最常見(jiàn)的傳染途徑。大鼠容易發(fā)生尿液自發(fā)性反流,易于造成逆行性感染,采用一側(cè)輸尿管暫時(shí)性阻塞、膀胱內(nèi)注射大腸埃希菌造成的急性逆行性腎盂腎炎模型,從致病菌、傳染途徑和病理學(xué)改變等方面均與人類(lèi)急性腎盂腎炎相似。大鼠模型制作方法簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,是研究人類(lèi)腎盂腎炎合適的動(dòng)物模型。而且模型中左腎增大,病變明顯,而右腎無(wú)明顯改變,故可作自身對(duì)照。

 

參考文獻(xiàn):

1.孫建實(shí),栗德林,邱曉彥,等.實(shí)驗(yàn)性腎盂腎炎動(dòng)物模型的建立與發(fā)病機(jī)制及中藥治療的研究.中醫(yī)藥信息,1997, 14(1):45-46

2.楊柳竹,寧越峰,李有華.實(shí)驗(yàn)性慢性腎盂腎炎小鼠免疫功能的研究.河北醫(yī)學(xué),1999,5(1): 15-18

3.楊培,郭兆安,張其蘭. 清利沖劑治療急性腎盂腎炎動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2003, 4 (6):330-331

4.周棟,孫偉,何偉明,等.急性腎盂腎炎大鼠模型的建立與觀(guān)察中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2007,14 (1):30-32

5.侯芳玉,高慶英,郭超.大鼠急性逆行性腎盂腎炎模型的制作.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)雜志,1998,8 (1):31-34

6.Gupta A,Sharma S,Nain CK,et al. Reactive oxygen species-mediated tissue injury in experimental ascending pyelonephritis. Kidney Int, 1996,49 (1):26-33

7.Tittel AP, Heuser C, Kurts C. Mouse model for pyelonephritis. Curr Protoc Immunol, 2013, Chapter 15:Unit 15.23.1-9

模型目錄
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急性腎盂腎炎動(dòng)物模型

前言

腎盂腎炎(pyelonephritis)又稱(chēng)上尿路感染,是病原微生物侵入腎盂、腎間質(zhì)和腎實(shí)質(zhì)所引起的炎癥性病變,好發(fā)于女性,男:女為1 : 10。根據(jù)臨床病程及癥狀,腎盂腎炎可分為急性及慢性?xún)善?。急性腎盂腎炎若治療不當(dāng)??蓮?fù)發(fā)或轉(zhuǎn)為慢性,最終進(jìn)入慢性腎功能不全階段。雖然隨著疾病譜的變化,以腎盂腎炎為基礎(chǔ)病變導(dǎo)致慢性腎功能不全的比例逐漸下降,但腎盂腎炎的發(fā)病率、復(fù)發(fā)率以及急性腎盂腎炎的轉(zhuǎn)慢率并未見(jiàn)降低。因此,制作與人類(lèi)腎盂腎炎相似的動(dòng)物模型,從發(fā)病機(jī)制上認(rèn)識(shí)腎盂腎炎,研究行之有效的治療方案是一項(xiàng)很有意義的工作。

部分造模方法

使用動(dòng)物:大鼠

【造模機(jī)制】:

暫時(shí)性結(jié)扎一側(cè)輸尿管,向膀胱內(nèi)注入大腸埃希菌,造成急性尿路感染,可形成急性、逆行性腎盂腎炎。

【造模方法】:

1.動(dòng)物 雄性Sprague Dawley大鼠,體重(200±20)g。

2.模型制備 選用大腸埃希菌O111B4標(biāo)準(zhǔn)菌株,37℃培養(yǎng)箱中肉湯過(guò)夜培養(yǎng)24小時(shí),使其濃度達(dá)0.5麥?zhǔn)蠁挝唬儆眉訕悠飨♂尵鷳乙?,使最終濃度達(dá)105/ml。大鼠禁水18小時(shí)后,2%戊巴比妥鈉40mg/kg,腹腔注射麻醉。動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上,腹部皮膚去毛后消毒,下腹正中切口約2cm, 逐層切開(kāi)腹壁進(jìn)入腹腔,在左側(cè)后腹壁辨識(shí)左側(cè)輸尿管后,在中段兩側(cè)分別向后腹壁外側(cè)穿線(xiàn),暴露膀胱,用動(dòng)脈夾夾閉陰莖,用TB針向膀胱內(nèi)緩慢注射0.5ml菌液,然后拉緊腹壁外側(cè)的縫合線(xiàn)兩端,以適當(dāng)?shù)乃删o度“結(jié)扎”輸尿管,清理腹腔,逐層縫合腹壁,恢復(fù)供水和飲食。術(shù)后24小時(shí)拆去腹壁外面的輸尿管結(jié)扎線(xiàn),使輸尿管重新開(kāi)放。

3.樣本收集和指標(biāo)測(cè)定 術(shù)后第7天用小夾子夾住尿道外口,防止尿液流出,處死動(dòng)物,取出左右腎臟。肉眼觀(guān)察雙腎大小及表面并稱(chēng)重,縱行切開(kāi)腎觀(guān)察縱切面,無(wú)菌操作抽取膀胱尿液,接種于平板培養(yǎng)基上,取1/2左腎制成勻漿做培養(yǎng),將縱切的另1/2左腎做病理組織切片,染色光鏡檢查。

【模型特點(diǎn)】:

1.結(jié)扎側(cè)腎臟表面可見(jiàn)數(shù)量不等的微小膿腫,個(gè)別腎臟可見(jiàn)較大膿腫突出腎臟表面,病變較重模型組動(dòng)物左腎明顯大于右腎,縱切面可見(jiàn)大小不等的膿腫,腎盂擴(kuò)張,有少量膿性分泌物。

2.動(dòng)物左腎組織出現(xiàn)明顯病理學(xué)改變,腎盂黏膜充血水腫,黏膜下大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),腎內(nèi)可見(jiàn)大小不等的膿腫,少數(shù)腎小管內(nèi)可見(jiàn)膿細(xì)胞和管型。

3.動(dòng)物尿路感染嚴(yán)重,尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率高達(dá)80%,左腎組織勻漿細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率也高達(dá)80。

【模型評(píng)估和應(yīng)用】:

人類(lèi)腎盂腎炎的致病菌以大腸埃希菌最多,逆行性感染是最常見(jiàn)的傳染途徑。大鼠容易發(fā)生尿液自發(fā)性反流,易于造成逆行性感染,采用一側(cè)輸尿管暫時(shí)性阻塞、膀胱內(nèi)注射大腸埃希菌造成的急性逆行性腎盂腎炎模型,從致病菌、傳染途徑和病理學(xué)改變等方面均與人類(lèi)急性腎盂腎炎相似。大鼠模型制作方法簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,是研究人類(lèi)腎盂腎炎合適的動(dòng)物模型。而且模型中左腎增大,病變明顯,而右腎無(wú)明顯改變,故可作自身對(duì)照。

 

參考文獻(xiàn):

1.孫建實(shí),栗德林,邱曉彥,等.實(shí)驗(yàn)性腎盂腎炎動(dòng)物模型的建立與發(fā)病機(jī)制及中藥治療的研究.中醫(yī)藥信息,1997, 14(1):45-46

2.楊柳竹,寧越峰,李有華.實(shí)驗(yàn)性慢性腎盂腎炎小鼠免疫功能的研究.河北醫(yī)學(xué),1999,5(1): 15-18

3.楊培,郭兆安,張其蘭. 清利沖劑治療急性腎盂腎炎動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2003, 4 (6):330-331

4.周棟,孫偉,何偉明,等.急性腎盂腎炎大鼠模型的建立與觀(guān)察中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2007,14 (1):30-32

5.侯芳玉,高慶英,郭超.大鼠急性逆行性腎盂腎炎模型的制作.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)雜志,1998,8 (1):31-34

6.Gupta A,Sharma S,Nain CK,et al. Reactive oxygen species-mediated tissue injury in experimental ascending pyelonephritis. Kidney Int, 1996,49 (1):26-33

7.Tittel AP, Heuser C, Kurts C. Mouse model for pyelonephritis. Curr Protoc Immunol, 2013, Chapter 15:Unit 15.23.1-9

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